Aseptic Process Simulation (APS / Media Fill): как организовать в Узбекистане

Что такое APS и зачем

Aseptic Process Simulation (APS), также известная как Media Fill, — валидационный тест, в котором продукт заменяется стерильной питательной средой, разлив которой имитирует реальный асептический процесс. Цель — подтвердить, что процесс способен производить стерильную продукцию.

EU GMP Annex 1 §8.85-8.122 (2022) делает APS обязательной для всех стерильных производств с асептическим разливом. Это не разовая процедура, а программа: первичная валидация + регулярные подтверждения.

APS проверяет три критических элемента одновременно:

• Дизайн процесса и оборудования (HVAC, RABS / isolator, lines).
• Поведение и асептическую технику персонала.
• Эффективность процедур уборки, дезинфекции, gowning.

Когда обязательно проводить

Триггер	Объём
Первичная валидация (до запуска коммерческого производства)	3 успешных APS подряд на каждой линии и каждой shift-конфигурации
Periodic re-qualification	Каждые 6 месяцев — 1 APS на shift
Major change в процессе или оборудовании	Полная APS
Изменение продуктовой линейки (новый размер контейнера, новый процесс)	APS с новым продуктом / форматом
После критического deviation / failed sterility test	APS как часть CAPA
Long shutdown / restart после простоя >30 дней	APS перед возобновлением
Существенный кадровый пересмотр (новые операторы >30%)	APS с новыми участниками

Для узбекистанских производителей, готовящихся к GMP-сертификации к 2027 г., APS — один из ключевых элементов validation package. Аудиторы EU GMP / PIC/S всегда запрашивают последние 3 APS-отчёта.

Состав теста: TSB или MEA

Базовая среда — Tryptic Soy Broth (TSB), она же Soybean Casein Digest Medium. Поддерживает рост:

• Бактерий — аэробы, факультативные анаэробы.
• Дрожжей — частично.
• Плесеней — ограниченно.

Для покрытия дрожжей и плесеней дополнительно или альтернативно используют SDA / MEA (Sabouraud / Malt Extract Agar) либо TSB с добавкой. На практике большинство предприятий ограничивается TSB как «универсальной» средой и подтверждают её способность поддерживать рост через growth promotion test (USP <61>).

Требования к среде для APS:

• Стерильна (от сертифицированного поставщика, ISO 13485 / GMP).
• Прошла growth promotion test на партии (S. aureus, B. subtilis, C. albicans, A. brasiliensis, P. aeruginosa).
• Совместима с материалом контейнера и пробкой (нет химической реакции).
• Прозрачная для визуального осмотра контаминации.

Объём заполнения — как для реального продукта (не меньше). Закупоривание — той же пробкой / крышкой, что используется в производстве.

Worst-case дизайн

Annex 1 §8.95-8.105 требует, чтобы APS моделировала самые неблагоприятные условия процесса. Принципы worst-case:

• Максимальная длительность смены — на 10-15% длиннее самой длинной коммерческой партии (если у вас 8 ч — APS 9-10 ч).
• Максимальное число interventions — все рутинные + типичные нерутинные операции (замена иглы, отбор образца, ремонт jam, замена бобины).
• Максимальное число операторов, включая ротацию shift, перерывы, замены.
• Максимальная скорость линии или, наоборот, минимальная (для коротких партий — выбирается худший режим).
• Минимальные размеры контейнеров (для филлинга в малые ампулы — выше риск).
• Максимальное время открытого вмешательства в зоне A.
• Все сценарии остановки/запуска линии.

Worst-case дизайн обосновывается в APS protocol и подкрепляется анализом исторических данных и FMEA.

Acceptance criteria: 0 контаминантов в 5 000+ единицах

Annex 1 §8.118-8.122 устанавливает критерии:

Размер партии APS (units)	Допустимое число контаминаций
< 5 000	0 (любая контаминация — failure)
5 000 - 10 000	0; 1 — расследование, повтор
> 10 000	0; 1 — расследование; 2 — failure

Минимальный размер APS-партии — обычно 5 000 единиц для линий с производительностью 5 000+ /смену. Для малых линий (например, лиофилизированные продукты с небольшой партией) — минимум должен покрывать одну полную смену, но не менее 3 000 единиц.

Инкубация — 14 дней:

• 7 дней при 20-25°C (грибы, плесени, дрожжи).
• 7 дней при 30-35°C (мезофильные бактерии).

Визуальный осмотр — на 7-й и 14-й день, всеми единицами; любое помутнение — изоляция, идентификация.

Кто проводит

APS — командный проект.

• QA-руководитель — owner, протокол, репорт, релиз.
• QP — финальная подпись на success.
• Microbiologist — growth promotion test, идентификация контаминаций, инкубация.
• Production lead — реализация процесса, координация смен.
• Все операторы, работающие в зоне A/B — обязательно участвуют в APS (раз в год минимум каждый).
• Engineering — настройка линии, поддержка interventions.
• EM-инженер — параллельный мониторинг во время APS (active air, settle plates, contact plates, glove fingerprints).

Документация: protocol, report

APS Protocol (составляется до проведения)

• Цели и объём (линия, продуктовая форма).
• Worst-case rationale.
• Состав среды, lot, growth promotion data.
• Размер партии, число interventions с описанием.
• Список участников и ролей.
• EM-программа на время APS (точки, частоты).
• Acceptance criteria и план действий при excursion.
• Cross-references на CCS, VMP, SOP.

APS Report (составляется после)

• Сводка проведения: дата, длительность, число units, число interventions.
• EM-результаты во время APS.
• Результаты инкубации: число контаминаций (если есть).
• Идентификация контаминаций.
• Заключение: pass / fail.
• Подписи: QA, QP, microbiologist, production lead.

Для шаблонов и подготовки можно использовать GMP-аудит чек-лист.

Что делать при провале APS

1. Карантин. Если APS была триггер re-qualification на запущенной линии — все произведённые после последнего успешного APS партии под формальным расследованием.
2. Identification. Идентификация контаминирующего микроорганизма до уровня вида (MALDI-TOF). Сопоставление с EM-флорой.
3. Root cause analysis. FMEA: процесс, оборудование, операторы, расходники, утилиты, помещение. Включая видеоразбор interventions.
4. CAPA. Конкретные действия — переобучение, замена SKU, ремонт оборудования, пересмотр SOP.
5. Re-validation. Минимум 3 успешных APS подряд для повторной квалификации линии.
6. Уведомление регулятора (для зарегистрированных продуктов с established APS history).

Расходники для APS

APS требует тех же расходников, что и реальная партия + специфика тестового материала:

• Стерильные комбинезоны и одежда зоны A/B — одноразовая стерильная одежда: комбинезоны Alsico/NPro, бахилы, шлемы, нарукавники.
• Стерильные перчатки — нитриловые длинные манжеты (Isofield Gecko, Contec Sterile Nitrile) с double-gloving для зоны A.
• Стерильные салфетки — Contec Polynit Sterile, EasyReach для протирки поверхностей.
• Стерильный 70% IPA — из категории дезинфектантов для обработки рук, поверхностей, инструмента.
• Спорициды — для подготовки помещения перед APS.
• Биологические индикаторы — контактные пластины TSA с нейтрализаторами для glove fingerprint и поверхностей; settle plates Ø90.
• Стерильная среда (TSB) — стерильно упакованная, с CoA growth promotion.
• Контейнеры — те же ампулы / флаконы / шприцы, что и в реальном производстве, той же партии.

CRS поставляет полный комплект расходников для APS под GMP-сертификацию: пакеты документов (TDS, CoA, сертификаты стерильности), складские стоки в Ташкенте.

Частые вопросы

Можно ли совмещать APS с обучением?
Нет. APS — валидация существующего процесса. Обучающие сессии и first-time-gowning должны быть до APS.

Сколько units минимум?
5 000 для большинства линий. Для малосерийных лиофилизированных — обоснование в protocol; обычно не меньше 3 000.

Что включать в interventions?
Все routine (наполнение бункера, корректировка позиции, замена иглы) и максимально все non-routine, ожидаемые в коммерческом производстве.

Можно ли использовать предыдущие EM-данные для оценки APS?
EM во время APS должна проходить параллельно — это часть валидации. Старые данные используются как контекст для trending, но не заменяют actual EM.

Считается ли APS успешной, если 1 контаминация при 8000 units?
Annex 1 допускает расследование при 1 / 5000-10000. Если расследование показывает атрибутивную причину (а не системный сбой) — линия может остаться квалифицированной, но требуется повтор APS.

Кто пишет protocol?
QA-инженер совместно с production lead и microbiologist. Approved by QA-head и QP.

Сколько по времени занимает полный цикл APS?
Подготовка протокола 2-4 недели, проведение 8-12 часов, инкубация 14 дней, осмотр и репорт 1-2 недели. Полный цикл — 6-8 недель.